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        關于動物細胞株工藝開發經驗分享
        發布時間:2021-10-22   點擊次數:33次
           動物細胞株大規模培養技術是指以生物反應器培養細胞為基礎,實現動物細胞工業化和規?;a,用于生產疫苗、單抗等生物制品。為提升生物制品的生產效率,保證產品質量,動物細胞大規模培養過程工藝需考慮高表達工程細胞系、個性化細胞培養基的應用、生物反應器工藝優化等。
          
          目前,上千升規模的生物反應器做國內應用也越來越廣泛,如何實現生產工藝放大是首先要考慮的,涉及生物反應器高徑比,剪切力(通氣方式、槳葉設計),通氣獲得DO效率(與攪拌系統、通氣方式、氣體流量),積累CO2的排出等內容,而這些因素往往是非線性放大的,這與生物反應器設備的設計、放大的關系最為密切。DO、pH、Temp、培養基流加策略等則是線性放大的。生物反應器工藝放大的困難往往在于這些非線性放大因素。
          
          關于動物細胞株工藝開發,有幾條經驗可考慮:
          1、pH控制
          高pH值的培養條件,即偏堿環境更容易導致乳酸生成。在流加培養時,可根據葡萄糖消耗速率添加葡萄糖,一般控制培養液中的葡萄糖濃度高于1-2.5g/L。同時控制合適的DO濃度,DO不足時細胞無氧代謝,不走TCA循環,導致乳酸產生。在不補加堿液的時候,pH的變化,一定程度上也可用于細胞生長狀態的評價。
          
          2、DO控制
          細胞從接種到收獲,隨著細胞密度或細胞狀態的變化,對溶氧的需求是一個由弱到強,再至穩定,然后減少的變化過程?;谝欢毎芏认碌娜苎跸乃俾?,是衡量細胞生長、細胞代謝,甚至是細胞生理狀態的重要指標。DO值的高低,能影響蛋白的糖基化等轉錄后修飾。
          
          3、CO2排出
          在高密度培養細胞時,反應器內CO2的積累往往成為一個問題,其通過影響培養環境的pH值、滲透壓對培養過程產生影響。小孔徑的通氣管,能提高通氣效率,但排CO2效率低;而大孔徑的通氣管,通氣效率降低,但驅趕CO2效果好。所以在生物反應器設計時,需要綜合考慮。
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